发展更精准高效的诊断技术

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本【běn】报记者 段梦【mèng】兰结核病的检【jiǎn】测诊【zhěn】断技术不断发展。随着分子生物学突飞【fēi】猛进，多种非痰液【yè】诊断【duàn】技术【shù】、高通量测【cè】序【xù】技术、核酸质谱检测技术等补充了传【chuán】统【tǒng】细菌学检测与诊断【duàn】方法，检测【cè】标本【běn】也从痰液标本扩展到非痰液标【biāo】本【běn】。

更加高效、准确的诊断技术，是终止结核【hé】病流【liú】行的【de】必要条件【jiàn】之一。在【zài】近期召开的2023年全【quán】国结核病【bìng】学术大会上，众【zhòng】多专家【jiā】学【xué】者就结核病检测、诊断等领域【yù】的技术发展【zhǎn】与突破【pò】进行了交流。

更快找到【dào】结核【hé】杆菌深【shēn】呼吸，低头，弯腰，用力【lì】咳【ké】嗽……长期以来，留痰【tán】获取痰液【yè】标本进行【háng】检测是临【lín】床诊断结【jié】核病【bìng】的“金标准”。1882年【nián】，德国科学家罗【luó】伯特·科赫首次发现并证明了【le】结核分枝【zhī】杆菌【jun1】是结核病的病原菌【jun1】。此后，痰涂【tú】片镜检技【jì】术成为沿用至今的结核病诊断方法。

据了【le】解【jiě】，目前【qián】结核病【bìng】的【de】检测诊【zhěn】断有细菌学、分子生物学、免【miǎn】疫学等几条路径，临床上【shàng】也通过X线检查进行影【yǐng】像学诊断。

“传统的细菌【jun1】学诊断方法包【bāo】括痰涂片镜检和痰结核菌培养等，但临【lín】床上看痰涂【tú】片【piàn】敏感度较低，痰【tán】结核【hé】菌培养耗【hào】时较长，严重影响了结核病的早期精【jīng】准高效诊断。”山东大【dà】学附【fù】属公共卫生临【lín】床中心结核【hé】科丁彩红副主【zhǔ】任【rèn】医【yī】师说，在【zài】痰【tán】液标本检测【cè】中，当【dāng】患者无痰或无法提供高质量【liàng】痰液时，可能无法获取准确的诊断【duàn】结果。

丁彩红表示，近年来【lái】，一批如【rú】GeneXpertMTB/RIF等用于结核病早【zǎo】期【qī】诊断的快【kuài】速诊断技术大大提高了诊【zhěn】断准确【què】性，缩短了诊断时【shí】间【jiān】。但在痰液【yè】稀少或无痰结核患者中，此【cǐ】类检【jiǎn】测技术的灵敏度也会打折扣。

具有高【gāo】灵【líng】敏度和【hé】特异度的分【fèn】子生物学检测诊断技术【shù】为患者早期【qī】诊【zhěn】断及精【jīng】准治疗提供了依据，目【mù】前被迅【xùn】速推广，属于热【rè】门研究领域。首都医科大学附属北京胸【xiōng】科【kē】医院结【jié】核一科副主任聂【niè】文娟【juān】说，将分【fèn】子生物学【xué】检测诊断技术应【yīng】用于病原学诊断，可以实现更高【gāo】效、精准的检【jiǎn】测。

“比【bǐ】如，通过分子生【shēng】物学技【jì】术检测【cè】患【huàn】者的体液标本，找到【dào】包括结核分枝杆菌在内的病原微【wēi】生物基因，以此【cǐ】诊断【duàn】疾病。”聂文【wén】娟【juān】介绍，传统痰结【jié】核【hé】菌培【péi】养需【xū】要花费近1个月时间，而分子【zǐ】生物【wù】学技术可【kě】以在1天内实【shí】现诊断。这意味着，找到结核分枝杆菌变得【dé】更快、更准【zhǔn】。

多【duō】条路径指向共同目标“我们【men】向着终结结【jié】核【hé】病【bìng】流行的【de】共同目标努【nǔ】力。”会上，众多专家学【xué】者就近期结核病检【jiǎn】测【cè】、诊断技术的探索与发现进【jìn】行了分享。

“我们近期【qī】的【de】研【yán】究【jiū】验【yàn】证了纳【nà】米孔测序技术用于疑似肺结核患者支气管【guǎn】肺泡灌洗【xǐ】液样【yàng】本的诊断【duàn】价值。”聂文娟介【jiè】绍【shào】，该研究对【duì】现有分子生【shēng】物学技术进行了优化，运用高通【tōng】量的纳米孔测序技【jì】术【shù】，实【shí】现同时检测多种基因片段【duàn】，短时间内获取样本中微生【shēng】物的【de】生物学信息，同时检测其基因【yīn】序列是【shì】否发生耐药基因突变。

“我们不【bú】仅能【néng】够高效找到【dào】结核分枝【zhī】杆菌，还能同步【bù】判断找到的细菌是‘敏感’还【hái】是‘耐药’，一举多【duō】得。”聂文【wén】娟【juān】说。

“在【zài】临床中，细菌学【xué】检测【cè】为阴性的肺结核患者占【zhàn】有一【yī】定比例，存【cún】在一定【dìng】的误诊和【hé】漏诊。”丁彩红【hóng】及团【tuán】队成员【yuán】利用核酸质谱检测技【jì】术对痰液及支气管肺泡灌洗液样【yàng】本检测发现，该技【jì】术【shù】有利于提【tí】高痰【tán】液含菌量较低的肺结核患者的【de】早期诊断率，可快【kuài】速检测结核分枝杆【gǎn】菌，并同时检测【cè】是【shì】否存在耐【nài】药情况。

新型高【gāo】性能非【fēi】痰液诊断【duàn】技术不断发【fā】展，覆盖更多无痰或少痰患【huàn】者。“基于新兴【xìng】的CRISPR检测【cè】技【jì】术，我【wǒ】们追踪了血【xuè】液标【biāo】本【běn】中结核分枝杆菌的无细胞DNA，为快速诊【zhěn】断结核病并监测药物治【zhì】疗【liáo】是否有效提【tí】供了【le】依据。”深圳国家感染性疾病临床医学【xué】研究中心【xīn】特聘副研究员【yuán】黄震介【jiè】绍，该技术尤其在细菌学检测方法未检测到或【huò】细菌较少的肺结核病例的早期【qī】诊断中，具有【yǒu】潜在【zài】价值【zhí】。

将人【rén】工智能运用到结核【hé】病【bìng】诊【zhěn】断领域也是【shì】当前热点之一。“在影像学诊断领域中，医生【shēng】读片子耗时耗力，尤其【qí】是在基层面临【lín】大量影像【xiàng】学【xué】内【nèi】容时，效率较低，准确率【lǜ】也容【róng】易受到影响。”黄【huáng】震说，不少研究者【zhě】将人【rén】工智能辅【fǔ】助医生判读【dú】运用到CT检查中【zhōng】，这对于结核病的大规模筛查、快【kuài】速诊断有重要意【yì】义【yì】。

推【tuī】动【dòng】更【gèng】广泛运【yùn】用新技【jì】术“在研究者不断探索更加高【gāo】效、精准的检测诊断方法的【de】同时，疑似肺结核患者【zhě】依旧【jiù】应该尽量【liàng】通过痰液标本进【jìn】行筛查【chá】。细【xì】菌学诊断方法仍【réng】是【shì】结核病【bìng】诊断的‘金标准’。”丁彩红表示，在【zài】条件允许【xǔ】的情况下，如果仅通过痰液【yè】标本检测就能诊断【duàn】肺结核并尽早开始治疗【liáo】，无疑是好事。但痰中【zhōng】检测不到结核分枝杆菌【jun1】并不意味着【zhe】不【bú】是肺结核，需要更进【jìn】一步的精准检【jiǎn】测【cè】。

“尽管许多技术和【hé】研究仍处于早期开发或试验【yàn】阶段，但近年【nián】来我们【men】的诊断能【néng】力一直【zhí】在加强【qiáng】，可用的高【gāo】效【xiào】、精准诊断技【jì】术和工具越来越多。”黄震介绍【shào】，在分子生物学技术领域【yù】，诊断能力的加强首先【xiān】体【tǐ】现在标本【běn】扩展上【shàng】。检测标本从痰液标本逐渐拓展【zhǎn】到非痰液标本，包括血液、尿【niào】液、粪便【biàn】、支【zhī】气管肺泡【pào】灌洗【xǐ】液等，为患【huàn】者提供【gòng】了更多便利。

“对【duì】于咳【ké】痰条件不允许【xǔ】、无【wú】法自己产生高质量痰液【yè】的【de】人群【qún】，尤其是【shì】儿童、肺外结【jié】核患者、艾滋病患者等，基于非痰液【yè】标本的检测诊断技术飞速发展具有重【chóng】要意义。”黄震说，通【tōng】过早期诊断、早期干预【yù】、早期治疗，能够有效避免此【cǐ】类人群【qún】患【huàn】结【jié】核病后的快速重症化。

结核病的早期确【què】诊对于尽早【zǎo】治疗【liáo】、减少疾病传播至【zhì】关【guān】重要，但目前结核病【bìng】发现率和【hé】报告率仍有待进【jìn】一步提高。“我们要采【cǎi】取主【zhǔ】动发现策略，对部分【fèn】人群【qún】进行筛查检测【cè】。”首都医科大学附属北京胸科医院细菌免疫室主任【rèn】逄宇介绍【shào】道，在诊断技术方面，需进一步【bù】开发具有更【gèng】高敏感度和特【tè】异性的即【jí】时便【biàn】携式【shì】检测【cè】方【fāng】法和手段。

研究者们对舌拭【shì】子、深【shēn】喉检测【cè】等便【biàn】携式或自采样【yàng】标本【běn】检测技【jì】术也进行了【le】初步【bù】探索【suǒ】。“我们此前进行了有关舌拭子和深喉检测的研究，不【bú】少研【yán】究证明此类【lèi】方法是有【yǒu】准【zhǔn】确性和【hé】适用【yòng】性【xìng】的。”逄宇说，通过【guò】规范流程采集到的样本，可以作为一种较为可靠的痰液标本替代类型，在【zài】更精准【zhǔn】优【yōu】化采样流程、提高检测效能的未来【lái】，可助【zhù】力大【dà】规模人群筛查【chá】。

从【cóng】目【mù】前【qián】来【lái】看，一些较【jiào】为前沿【yán】的检测技术流程已经比较成【chéng】熟。逄宇强调【diào】，新技术在临床应用方面【miàn】需要进一步规范和优化，通【tōng】过多方配【pèi】合，推动更多医【yī】疗【liáo】机构运【yùn】用新技【jì】术，惠及更多人。

2014年，世界卫【wèi】生组织提出【chū】“终止结核病【bìng】战略”，并提出了【le】2035年目标：与【yǔ】2015年相比【bǐ】，结核【hé】病发病率减【jiǎn】少90%，死亡数减【jiǎn】少95%，结核病【bìng】的发病率降至10/10万以下。“要【yào】实现‘终止结核【hé】病战略’的目标【biāo】，我们需进一步努力。”黄震说，探索更多的有效检测诊断技术，让更多潜【qián】伏性结核感染者得到【dào】干预【yù】，让更多【duō】结【jié】核【hé】病【bìng】患者【zhě】得到【dào】有【yǒu】效【xiào】治【zhì】疗，还【hái】有很多路要走。