pda培养基如何配置_PDA培养基的配制方法 环球观点

1、PDA培【péi】养基【jī】的【de】配方土豆 200g葡萄糖 20g琼脂 15～20g水 1000mLpH值 自然PDA培养【yǎng】基的配制称【chēng】量和熬【áo】煮 按培养基配方逐一称取去【qù】皮【pí】土豆。

2、土【tǔ】豆切成小【xiǎo】块放【fàng】入锅中，加水1000ml，在【zài】加热器【qì】上【shàng】加【jiā】热至沸腾，维持20-30min，用可【kě】用2层【céng】纱布趁热【rè】在量杯上过滤，滤渣弃取。

3、滤液补充水分到1000ml。

(资料图)

4、加热溶解 把滤液放入锅中，加【jiā】入葡萄糖【táng】20g，琼脂【zhī】15～20g(提【tí】前搞【gǎo】碎)，然后放在石棉网上，小火加【jiā】热，并用【yòng】玻【bō】棒【bàng】不【bú】断搅拌，以防琼脂糊底【dǐ】或溢出，待琼脂完全溶解【jiě】后，再补【bǔ】充【chōng】水分至所需量。

5、分装 按实训【xùn】要求，将【jiāng】配制的培【péi】养基分装入试管或500ml三角瓶内。

6、分装时可用三角漏斗以免使培养基沾在管口或瓶口上造成污染。

7、分【fèn】装量：固体【tǐ】培养基约为试管高度【dù】的1/5，灭菌后【hòu】制成斜面【miàn】，分装入三角瓶内以不超过其容积的一【yī】半为宜;半固体培养基以试管高【gāo】度的1/3为宜【yí】，灭【miè】菌【jun1】后垂直【zhí】待凝。

8、加棉塞 培养基分装完毕【bì】后，在试管【guǎn】口或【huò】三角烧瓶口上塞上棉塞(或泡沫塑【sù】料塞或【huò】试管帽等)，以阻【zǔ】止外【wài】界微【wēi】生【shēng】物进入培养【yǎng】基内造成污染【rǎn】，并保证有良好【hǎo】的通气性【xìng】能。

9、包扎 加塞后，将全【quán】部试管用麻【má】绳或橡皮筋捆好，再在棉【mián】塞【sāi】外包一【yī】层牛皮纸，以防止灭菌时冷凝水润湿棉塞【sāi】，其外再用一【yī】道【dào】线绳或橡皮筋扎好，用记号【hào】笔【bǐ】注明【míng】培养基【jī】名称【chēng】、组别、配制日期。

10、棉【mián】塞【sāi】制作【zuò】说明【míng】棉塞的作【zuò】用：一【yī】是防止杂【zá】菌污染【rǎn】;二是可过滤空气，保【bǎo】证通气良【liáng】好，并可减缓培【péi】养基水分的蒸发，所以正确地【dì】制备棉塞是培养基制备中重要的一环【huán】。

11、正【zhèng】确的棉塞是【shì】形【xíng】状、大小，松紧应与【yǔ】试管口(或三角烧瓶)完全【quán】适合。

12、过紧【jǐn】则【zé】妨碍空【kōng】气流【liú】通，操作【zuò】不便;过松时，空气会毫无障碍地进【jìn】入【rù】试管(或【huò】三角【jiǎo】烧瓶)中，达不到灭菌的目的。

13、棉塞过小往往【wǎng】易掉【diào】进【jìn】试【shì】管内，因此【cǐ】棉塞质量的优劣对实训的结果有很大【dà】的影响。

14、正确的棉【mián】塞头较大，加塞【sāi】时，应使【shǐ】棉【mián】塞【sāi】长度的1/3留在试管口外，2/3在试管口内【nèi】。

15、目前，有条【tiáo】件的实训室已使用坚固的塑料【liào】试管帽、金【jīn】属试管帽、硅【guī】胶泡【pào】沫【mò】塞【sāi】替【tì】代棉塞【sāi】，制作棉塞要选纤维较长的棉花，一般不选用脱脂棉。

16、因为它容易吸水变湿，造成污染，而且价格也贵。

17、PDA培养基配制注意【yì】事【shì】项培养【yǎng】基经灭菌后，必须放【fàng】在37C温箱培养24h，无菌生长者方【fāng】可使用【yòng】。

18、PDA培养基一般不需要调pH。

19、对于要调节pH的培养基，一般用pH试纸测定其pH。

20、如果培养基偏酸或【huò】偏碱【jiǎn】时，可【kě】用lmol/LNaOH或lmol/LHCL溶液【yè】进行调节。

21、调节【jiē】时应逐滴加【jiā】入NaOH或HCl溶液，防止局部过酸或过碱【jiǎn】破坏【huài】培养基成分。

22、培养基在使用时也【yě】可【kě】以【yǐ】做成不含琼脂的液【yè】体培养基，用于菌类的震荡【dàng】培【péi】养。

23、培养基也【yě】可以加入【rù】氯霉素或土霉【méi】素，加入量为0.2g/L培【péi】养基，主要是为了【le】抑【yì】制细菌的生长，减少【shǎo】干扰性【xìng】。

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